藥用植物學與生藥學實驗及學習指導 節選

**部分 實驗指導 實驗須知 實驗室規則 1.進實驗室前，必須預習實驗內容，明確實驗目的，了解實驗的基本原理、內容和方法。 2.實驗室中應保持安靜，不許抽煙，不許大聲喧嘩，精力要集中，不得擅自離開操作臺。 3.保持實驗室桌上的整潔，愛護顯微鏡和一切工具，不得隨意浪費實驗材料和藥品。 4.實驗報告必須在實驗室內完成，不得抄襲。 5.每次實驗完畢后，切片要從載物臺取下，歸還切片盒，桌上一切用具應拭洗干凈，并歸還原處，學生輪流值日，離開實驗室前一定要檢查門、窗、水、電是否關閉。 實驗報告的寫作法 1.按照每次實驗報告要求，在紙上繪圖或寫成報告。 2.繪圖時，估計每次實驗中需繪圖數目的多少，在紙上適當分配繪圖位置。 3.注意所繪的圖與實物大小的比例，繪圖時鉛筆要預先削尖，線條要用平滑的單線，避免一切模糊、紊亂的線條或陰影。 4.繪圖時應力求真實，不得抄襲書本或他人作業，字體要端正，圖的排列要求整齊清潔，注明各圖的名稱，并用平行線向右引注各部的名稱。 實驗一 植物細胞的顯微結構 [目的要求] 1.初步掌握植物細胞的基本結構。 2.掌握細胞壁性質的鑒別方法。 3.通過本實驗了解顯微鏡的構造、性能及使用方法。 [實驗材料與儀器] 1.儀器與器材 顯微鏡、鑷子、解剖針、刀片、載玻片、蓋玻片、培養皿、吸水紙、酒精燈。 2.試藥 碘-碘化鉀試液、甲基藍染液、10%碘甘油、蘇丹Ⅲ試液、95%乙醇、稀甘油、α-萘酚、濃硫酸、水合氯醛試液、間苯三酚、釕紅、氯化鋅碘液。 3.材料 洋蔥鱗莖或大蔥鱗莖、馬鈴薯塊莖、亞麻種子、桔梗根、大麗菊塊根；半夏粉末、浙貝粉末、大黃粉末、黃柏粉末、大蔥干燥膜質鱗葉、木賊莖、梨果肉、黃柏栓皮。 [實驗內容] 一、洋蔥表皮細胞的制片 取洋蔥鱗莖，用刀片在其內表皮輕輕劃開幾個邊長約為0.5cm的小方塊，然后用鑷子夾住一邊，輕輕撕取，選取*薄的一塊迅速放在滴有蒸餾水的載玻片上，要使表皮平展，如有重疊或被折可用解剖針將其展平，然后再用蓋玻片封片。 二、觀察洋蔥鱗葉表皮細胞的基本結構 將制好的洋蔥表皮裝片置于顯微鏡下進行觀察，可見以下幾部分： 1.細胞壁 洋蔥表皮細胞的細胞壁幾乎為無色透明的，在顯微鏡下觀察僅能看到每一細胞的四壁組成的輪廓，而上下兩層細胞壁看不到。所看到的細胞壁實際是由兩相鄰細胞共同組成，它包括兩相鄰細胞的兩層初生壁，以及兩相鄰細胞所具有的胞間層，故所見細胞壁為三層結構。 2.細胞質 在成熟的細胞中，細胞質為緊貼細胞壁薄薄的一層，可見到細胞核位于其中，并可看到許多細小顆粒。 3.細胞核 為半透明狀圓形的小物體，因其有較強的折光性，比細胞質容易看見。在細胞核內還可明顯地看到1至多個顆粒狀核仁。 4.液泡 在未成熟細胞中常見到數個小液泡在細胞內分散存在。在成熟的細胞中，液泡常占據中央的絕大部分，它將細胞質、細胞核等擠向緊貼細胞壁處。 三、碘-碘化鉀試液或甲基藍染液染色觀察 用碘-碘化鉀試液或甲基藍染液代替蒸餾水直接裝片，或在已經用蒸餾水制好的裝片進行。將碘-碘化鉀試液或甲基藍染液滴在蓋玻片的一側，在蓋玻片的另一側用吸水紙將水吸出，不斷使其試液流入蓋玻片下，使細胞染色，經染色后，細胞核染色較深，細胞質染色較淺，液泡不被染色，使細胞內的結構更為清晰。 四、木質化細胞壁 木質化細胞壁主要是由木質素沉積于細胞壁上面所形成，多為次生壁。具木質化細胞壁的成熟細胞多為死細胞，如導管、管胞、木纖維、石細胞等。這些類型的細胞由于壁較為堅硬，不易破壞，又因為各種細胞具有不同的形態特征，往往是各類粉末藥材的重要鑒定依據。 取梨果肉少許于載玻片上，并用解剖針將果肉輕輕搗碎，滴加間苯三酚和濃硫酸各1滴，封片后鏡檢，可見許多具有極厚木化壁的細胞成團或散在，均被染成櫻紅色或紫紅色。 五、木栓化細胞壁 木栓化細胞壁是由于滲入了脂肪性木栓質的結果。木栓細胞多位于植物體根和莖的表面，通常排列整齊、緊密，無細胞間隙，細胞壁較厚，也是組織和藥材粉末常用的鑒定依據。 取黃柏的栓皮或馬鈴薯塊莖做徒手切片，選取較薄的組織切片置于載玻片上，滴加蘇丹Ⅲ試液1滴，在酒精燈上輕輕加熱后封片，觀察顏色變化，并與角質化細胞壁比較有什么不同。 六、角質化細胞壁 角質化細胞壁是指細胞產生的一些脂肪性物質，不但填充到細胞壁內，又常在植物某些器官的表皮外側形成一層角質，又叫角質層。角質層的薄厚往往與植物種類及生態環境有關，實驗中所觀察到*明顯的部分主要是角質層。 取夾竹桃葉片做橫切片，置于載玻片上，滴加蘇丹Ⅲ試液1滴，在酒精燈上加熱，稍放片刻，加稀甘油1滴封片觀察。可清楚地看到葉的上下表皮外側有一條緊緊與表皮細胞連到一起的橙紅色亮帶，這便是角質層。 七、礦質化細胞壁 在某些植物細胞壁內常含有大量的硅質或鈣質等，其中含有硅質的細胞較多。 細胞所含有的二氧化硅可溶于氟化氫溶液，但不溶于醋酸或濃硫酸，用這種方法可鑒別硅質是否存在，同時也是用于與草酸鈣和碳酸鈣晶體區別的方法之一。 八、黏液化細胞壁 黏液化細胞壁是細胞壁所含有的纖維素和果膠質等成分發生變化而成黏液質膠和樹脂類物質，這類物質遇水膨脹并有部分溶解，因此在制片過程中要用乙醇裝片觀察。 取亞麻種子做橫切片，加釕紅試液1滴裝片觀察。因釕紅試劑可將黏液質染成紅色，故可確定所觀察到的被染成紅色的種子外表皮為黏液化細胞壁。 [作業] 1.繪3～4個洋蔥表皮細胞，并注明各部分名稱。 2.簡述幾種細胞壁的顯微化學鑒別方法。 [思考題] 1.植物細胞的顯微構造有何特點？ 2.植物細胞與動物細胞在結構上有何區別？