第1章 引言 1.1 基因工程的概念 1.2 基因工程的研究內容 1.2.1 基因克隆工具的研究 1.2.2 基因克隆技術的研究 1.2.3 克隆對象——目的基因的研究 1.2.4 基因工程產品的研究 1.3 基因工程的研究意義 1.3.1 創造出新的生物類型 1.3.2 按意愿進行設計和控制 1.3.3 推動著生物學與醫學研究的發展 1.3.4 蘊藏著巨大的潛在生產力 1.4 基因工程的安全性研究第2章 基因工程的工具酶與克隆載體 2.1 基因工程的工具酶 2.1.1 基因工程常用的工具酶 2.1.2 限制性內切核酸酶 2.1.3 DNA連接酶 2.1.4 DNA聚合酶 2.1.5 末端轉移酶 2.1.6 T4多聚核苷酸激酶 2.1.7 堿性磷酸酶 2.1.8 S1核酸酶 2.1.9 Bal31核酸酶 2.1.10 外切核酸酶 2.2 基因工程的克隆載體 2.2.1 質粒栽體 2.2.2 噬茵體載體 2.2.3 噬茵粒載體 2.2.4 柯斯質粒栽體 2.2.5 人工染色體載體 2.2.6 病毒表達載體 2.2.7 反轉錄病毒載體第3章 基因工程中的典型技術研究 3.1 核酸的提取與純化 3.1.1 DNA的提取與純化 3.1.2 RNA的提取與純化 3.2 凝膠電泳技術 3.2.1 DNA凝膠電泳 3.2.2 脈沖場凝膠電泳 3.2.3 蛋白質雙向凝膠電泳 3.2.4 變性梯度凝膠電泳 3.3 分子雜交技術 3.3.1 核酸探針 3.3.2 Southern印跡雜交 3.3.3 Northern印跡雜交 3.3.4 菌落(或噬菌斑)印跡雜交 3.3.5 斑點印跡雜交和狹線印跡雜交 3.4 PCR技術 3.4.1 PCR技術的基本原理 3.4.2 PCR反應體系 3.4.3 PCR反應條件 3.4.4 PCR反應的應用模式 3.5 DNA序列分析 3.5.1 Maxam-Gilbert化學降解法 3.5.2 Sanger雙脫氧鏈終止法 3.5.3 DNA的自動化測序 3.5.4 新一代測序技術 3.6 研究蛋白質與DNA相互作用的方法 3.6.1 酵母雙雜交系統 3.6.2 酵母單雜交系統 3.6.3 凝膠阻滯試驗 3.6.4 DNaseI足跡試驗 3.6.5 甲基化干擾試驗第4章 目的基因的獲取途徑分析 4.1 化學合成法獲得目的基因 4.1.1 寡核苷酸化學合成 4.1.2 基因的半合成(酶促合成) 4.1.3 短片段直接連接法組裝DNA 4.2 篩選基因文庫獲取目的基因 4.2.1 基因組文庫的構建與篩選 4.2.2 cDNA文庫的構建與篩選 4.3 圖位克隆獲得目的基因 4.3.1 染色體步移法篩選目的基因 4.3.2 染色體登陸法篩選目的基因 4.4 轉座子標簽法獲得目的基因 4.5 根據基因差異表達獲得目的基因 4.5.1 mRNA差異顯示技術 4.5.2 抑制性差減雜交技術第5章 外源基因的表達 5.1 外源基因在原核細胞中的表達 5.1.1 原核生物基因表達載體 5.1.2 原核表達的受體系統 5.2 外源基因在真核細胞中的表達 5.2.1 酵母表達系統 5.2.2 昆蟲細胞表達系統 5.2.3 哺乳動物細胞表達系統第6章 轉基因動植物 6.1 轉基因動物 6.1.1 轉基因動物的概念 6.1.2 外源基因導入動物細胞的方法 6.1.3 轉基因動物的檢測 6.1.4 轉基因動物的應用 6.2 轉基因植物 6.2.1 外源基因導入植物細胞的方法 6.2.2 轉基因植物的篩選與檢測 6.2.3 轉基因植物的應用第7章 基因治療 7.1 基因治療概述 7.1.1 基因治療的定義 7.1.2 基因治療的基本程序 7.2 基因的轉移載體 7.2.1 病毒載體 7.2.2 非病毒載體 7.3 基因治療的應用 7.3.1 遺傳病的基因治療 7.3.2 腫瘤的基因治療 7.3.3 艾滋病的基因治療參考文獻