概述1**章微生物實驗的無菌環(huán)境和操作5**節(jié)微生物實驗的無菌環(huán)境5一、無菌室5二、超凈工作臺6三、環(huán)境無菌檢測的方法8第二節(jié)微生物實驗的無菌操作14一、無菌操作前的準(zhǔn)備工作14二、滅菌和消毒方法14第二章微生物實驗的重要儀器23一、普通光學(xué)顯微鏡23二、高壓蒸汽滅菌鍋24三、 移液器25四、電子天平27五、 ph計28六、分光光度計29七、超凈工作臺30八、恒溫培養(yǎng)箱30九、搖瓶培養(yǎng)設(shè)備30十、冰箱及超低溫冰箱31十一、離心機32十二、真空冷凍干燥機33十三、pcr儀34十四、 厭氧培養(yǎng)箱35十五、生物安全柜36十六、電熱恒溫干燥箱37第三章顯微鏡使用和形態(tài)學(xué)觀察39實驗一普通光學(xué)顯微鏡的使用41實驗二暗視野顯微鏡的使用47實驗三相差顯微鏡的使用50實驗四微分干涉差顯微鏡的使用53實驗五熒光顯微鏡的使用56實驗六微生物大小測定59實驗七微生物的形態(tài)觀察63實驗八微生物染色技術(shù)66第四章微生物的培養(yǎng)、分離及生長72實驗九培養(yǎng)基的配制和高壓蒸汽滅菌73實驗十微生物的接種分離和純培養(yǎng)78實驗十一亨蓋特法厭氧培養(yǎng)基的制備82實驗十二厭氧微生物的分離培養(yǎng)86實驗十三噬菌體的分離純化和效價測定90實驗十四微生物的計數(shù)——血細(xì)胞計數(shù)法93實驗十五微生物的計數(shù)——平板活菌計數(shù)法96實驗十六比濁法測定細(xì)菌生長曲線99實驗十七干重和濕重法測定微生物的生長量102第五章微生物遺傳學(xué)技術(shù)104實驗十八微生物的誘變和突變株的篩選105實驗十九營養(yǎng)缺陷型突變株的選育108實驗二十菌種保藏技術(shù)112第六章分子生物學(xué)技術(shù)119一、目的基因的獲得119二、載體系統(tǒng)的選擇119三、目的基因與載體的重組119四、重組載體引入受體細(xì)胞120五、重組受體細(xì)胞的篩選和鑒定120六、目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)120實驗二十一細(xì)菌總dna的提取和瓊脂糖凝膠電泳121實驗二十二基本pcr技術(shù)擴增dna片段124實驗二十三堿裂解法和試劑盒法提取質(zhì)粒dna126實驗二十四dna分子的限制性內(nèi)切酶消化、片段純化、連接130實驗二十五感受態(tài)細(xì)胞的制備133實驗二十六重組dna轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞135第七章微生物檢測和鑒定137實驗二十七微生物的營養(yǎng)及生理生化反應(yīng)138實驗二十八應(yīng)用api20e細(xì)菌鑒定系統(tǒng)鑒定腸桿菌科和部分其他革蘭氏陰性桿菌142實驗二十九以細(xì)菌16s rrna序列和真菌its序列為基礎(chǔ)的菌種鑒定146第八章微生物技術(shù)的應(yīng)用150實驗三十土壤中纖維素分解菌的分離151實驗三十一食品樣品中菌落總數(shù)的測定159實驗三十二食品樣品中大腸菌群mpn值的測定161實驗三十三原生質(zhì)體的制備167實驗三十四原生質(zhì)體的融合169附錄ⅰ常用染色液的配制171附錄ⅱ常用培養(yǎng)基配方173附錄ⅲ常用緩沖液的配制176參考文獻(xiàn)178